Et ginn zwou Haaptquellen vun der Kontaminatioun a proppere Raim: Partikelen a Mikroorganismen, déi duerch mënschlech a Ëmweltfaktoren oder verwandte Aktivitéiten am Prozess verursaacht kënne ginn. Trotz de beschte Beméiunge kann d'Kontaminatioun ëmmer nach an de proppere Raum andréngen. Spezifesch üblech Kontaminatiounsträger sinn de mënschleche Kierper (Zellen, Hoer), Ëmweltfaktoren wéi Stëbs, Damp, Niwwel oder Ausrüstung (Laboratoireausrüstung, Botzmëttel) a falsch Ofwëschtechniken a Botzmethoden.
Dee heefegsten Iwwerdroer vu Kontaminatioun sinn d'Leit. Och mat der strengster Kleedung an de strengsten Operatiounsprozeduren stellen falsch ausgebilte Mataarbechter déi gréisst Bedrohung fir Kontaminatioun a Cleanrooms duer. Mataarbechter, déi sech net un d'Richtlinne fir Cleanroom halen, stellen e Risikofaktor duer. Soulaang ee Mataarbechter e Feeler mécht oder e Schrëtt vergiesst, féiert dat zu enger Kontaminatioun vum ganze Cleanroom. D'Firma kann d'Sauberkeet vum Cleanroom nëmme garantéieren, andeems se kontinuéierlech iwwerwaacht a weider Ausbildungen aktualiséiert, ouni Kontaminatiounsquote.
Aner grouss Quelle vu Kontaminatioun sinn Handwierksgeschir an Ausrüstung. Wann e Won oder eng Maschinn nëmme grob ofgewëscht gëtt, ier se an de Cleanroom erakommen, kënne Mikroorganismen domat erakommen. Dacks si sech d'Mataarbechter net bewosst, datt Ausrüstung op Rieder iwwer kontaminéiert Uewerfläche rullt, wa se an de Cleanroom gedréckt gëtt. Uewerfläche (inklusiv Biedem, Maueren, Ausrüstung, asw.) gi routineméisseg op liewensfäeg Zuelen getest mat speziell entwéckelte Kontaktplacken, déi Wuesstumsmedien wéi Trypticase Soja Agar (TSA) a Sabouraud Dextrose Agar (SDA) enthalen. TSA ass e Wuesstumsmedium, dat fir Bakterien entwéckelt gouf, an SDA ass e Wuesstumsmedium, dat fir Schimmelpilze an Hefen entwéckelt gouf. TSA an SDA ginn typescherweis bei verschiddenen Temperaturen inkubéiert, woubäi TSA Temperaturen am Beräich vun 30-35˚C ausgesat ass, wat déi optimal Wuesstumstemperatur fir déi meescht Bakterien ass. De Beräich vun 20-25˚C ass optimal fir déi meescht Schimmelpilze- an Hefaarten.
D'Loftstroumung war fréier eng heefeg Ursaach fir Kontaminatioun, awer mat den haitege Cleanroom-HVAC-Systemer ass d'Loftkontaminatioun praktesch eliminéiert. D'Loft am Cleanroom gëtt reegelméisseg (z.B. deeglech, wöchentlech, véiereljährlech) op Partikelzuelen, Liewensdauerzuelen, Temperatur a Fiichtegkeet kontrolléiert a kontrolléiert. HEPA-Filter gi benotzt fir d'Partikelzuel an der Loft ze kontrolléieren a kënnen Partikelen bis op 0,2µm erausfilteren. Dës Filter ginn normalerweis kontinuéierlech mat enger kalibréierter Duerchflussquote lafe gelooss, fir d'Loftqualitéit am Raum z'erhalen. D'Fiichtegkeet gëtt normalerweis op engem niddrege Niveau gehalen, fir d'Verbreedung vu Mikroorganismen wéi Bakterien a Schimmel ze verhënneren, déi fiicht Ëmfeld léiwer hunn.
Tatsächlech ass déi héchst a heefegst Quell vu Kontaminatioun an engem Cleanroom den Operateur.
D'Quellen an d'Attraktiounsweeër vun der Kontaminatioun variéiere net wesentlech vun Industrie zu Industrie, awer et gëtt Ënnerscheeder tëscht de Branchen wat d'tolerabel an net tolerabel Kontaminatiounsniveauen ugeet. Zum Beispill brauche Produzente vu schléckbare Pëllen net deeselwechten Niveau vun der Rengheet ze halen wéi Produzente vun injizéierbare Mëttelen, déi direkt an de mënschleche Kierper agefouert ginn.
Pharmazeutesch Hiersteller hunn eng méi niddreg Toleranz fir mikrobiell Kontaminatioun wéi High-Tech-Elektronikhersteller. Hallefleiterhersteller, déi mikroskopesch Produkter produzéieren, kënnen keng partikelfërmeg Kontaminatioun akzeptéieren, fir d'Funktionalitéit vum Produkt ze garantéieren. Dofir maache sech dës Firmen nëmmen Suergen ëm d'Sterilitéit vum Produkt, dat am mënschleche Kierper implantéiert soll ginn, an ëm d'Funktionalitéit vum Chip oder Handy. Si maache sech relativ manner Suergen ëm Schimmel, Pilz oder aner Forme vu mikrobieller Kontaminatioun a Cleanrooms. Op der anerer Säit maache sech pharmazeutesch Firmen Suergen ëm all lieweg an dout Kontaminatiounsquellen.
D'Pharmaindustrie gëtt vun der FDA reglementéiert a muss sech strikt un d'Good Manufacturing Practices (GMP) Reglementer halen, well d'Konsequenze vun enger Kontaminatioun an der Pharmaindustrie ganz schiedlech sinn. Medikamentenhersteller mussen net nëmmen dofir suergen, datt hir Produkter fräi vu Bakterien sinn, si mussen och Dokumentatioun an Tracking vun allem hunn. Eng Firma, déi High-Tech-Ausrüstung produzéiert, kann e Laptop oder Fernseh verschécken, soulaang en säin internen Audit passéiert. Awer et ass net sou einfach fir d'Pharmaindustrie, dofir ass et fir eng Firma entscheedend, d'Betribsprozedure fir Cleanrooms ze hunn, ze benotzen an ze dokumentéieren. Aus Käschtegrënn engagéiere vill Firmen extern professionell Botzservicer fir Botzservicer duerchzeféieren.
E komplette Ëmwelttestprogramm fir propper Raim sollt siichtbar an onsichtbar Loftpartikelen enthalen. Obwuel et keng Fuerderung gëtt, datt all Kontaminanten an dëse kontrolléierten Ëmfeld vu Mikroorganismen identifizéiert ginn, sollt den Ëmweltkontrollprogramm en entspriechenden Niveau vun der bakterieller Identifikatioun vu Proufextraktiounen enthalen. Et gi vill bakteriell Identifikatiounsmethoden déi de Moment verfügbar sinn.
Den éischte Schrëtt an der Bakterienidentifikatioun, besonnesch wann et ëm d'Isolatioun vu proppere Raim geet, ass d'Gram-Faarfmethod, well se interpretativ Hiweiser op d'Quell vun der mikrobieller Kontaminatioun ka ginn. Wann d'mikrobiell Isolatioun an Identifikatioun grampositiv Kokken weist, kéint d'Kontaminatioun vum Mënsch kommen. Wann d'mikrobiell Isolatioun an Identifikatioun grampositiv Staangen weist, kéint d'Kontaminatioun vu Stëbs- oder Desinfektiounsmëttelresistente Stämm kommen. Wann d'mikrobiell Isolatioun an Identifikatioun gramnegativ Staangen weist, kéint d'Quell vun der Kontaminatioun vu Waasser oder all naasser Uewerfläch kommen.
D'Identifikatioun vu mikrobiellen Elementer a pharmazeutesche Cleanrooms ass ganz wichteg, well se mat ville Aspekter vun der Qualitéitssécherung zesummenhänkt, wéi Bioassays a Produktiounsëmfeld; bakteriell Identifikatiounstester vun Endprodukter; onbenannt Organismen a sterile Produkter a Waasser; Qualitéitskontroll vun der Fermentatiounslagertechnologie an der Biotechnologieindustrie; a Verifizéierung vu mikrobiellen Tester während der Validatioun. D'Method vun der FDA fir ze bestätegen, datt Bakterien an enger spezifescher Ëmwelt iwwerliewe kënnen, wäert ëmmer méi heefeg ginn. Wann d'mikrobiell Kontaminatiounsniveauen den spezifizéierten Niveau iwwerschreiden oder d'Resultater vun der Sterilitéitstest op Kontaminatioun hiweisen, ass et néideg d'Effektivitéit vu Botz- an Desinfektiounsmëttelen ze verifizéieren an d'Identifikatioun vu Kontaminatiounsquellen ze eliminéieren.
Et ginn zwou Methoden fir d'Ëmweltflächen am Reinraum ze iwwerwaachen:
1. Kontaktplacken
Dës speziell Kulturschalen enthalen e sterilt Wuessmedium, dat virbereet gëtt, fir méi héich wéi de Rand vun der Schossel ze sinn. Den Ofdeckung vun der Kontaktplack bedeckt d'Uewerfläch, déi geholl soll ginn, an all Mikroorganismen, déi op der Uewerfläch sichtbar sinn, hänken un der Agaroberfläche fest an inkubéieren. Dës Technik kann d'Zuel vun de Mikroorganismen, déi op enger Uewerfläch sichtbar sinn, weisen.
2. Ofstäbungsmethod
Dëst ass steril a gëtt an enger geeigneter steriler Flëssegkeet gelagert. De Stäbchen gëtt op d'Testfläch applizéiert an de Mikroorganismus gëtt identifizéiert andeems de Stäbchen am Medium erëmfonnt gëtt. Stäbchen ginn dacks op ongläiche Flächen oder a Beräicher benotzt, déi schwéier mat enger Kontaktplack ze testen sinn. D'Stäbchenprobe ass éischter e qualitativen Test.
Zäitpunkt vun der Verëffentlechung: 21. Oktober 2024